Método comunitario para la determinación cuantitativa del Δ 9 –THC.

Objeto y campo de aplicación

El método sirve para determinar el contenido de Δ 9 -tetrahidrocanabinol (THC) de las variedades de cáñamo (Cannabis sativa L.). Según el caso, se aplicará de acuerdo con el procedimiento A o con el procedimiento B que se describen a continuación.

El método se basa en la determinación cuantitativa por cromatografía en fase gaseosa (CFG) del Δ 9 -THC previa extracción mediante un disolvente.

Procedimiento A

El procedimiento A se utilizará para las comprobaciones en la fase de producción previstas en el apartado 2 del artículo 5 bis del Reglamento (CE) no 1251/1999.

Procedimiento B

El procedimiento B se utilizará para los casos indicados en el párrafo tercero del apartado 1 del artículo 7 del presente Reglamento y para comprobar la observancia de los requisitos establecidos en el párrafo segundo del apartado 1 del artículo 5 bis del Reglamento (CE) no 1251/1999 con miras a la inscripción en la lista de variedades de cáñamo destinado a la producción de fibras con derecho al pago por superficie a partir de la campaña 2001/02.

Muestreo

Toma de muestras

  • — Procedimiento A: en una población de una variedad de cáñamo dada, se tomará en cada planta seleccionada una parte de 30 cm que contenga como mínimo una inflorescencia femenina. Las muestras se tomarán durante el período comprendido entre los veinte días siguientes al comienzo de la floración y los diez siguientes al final de la misma, durante el día, según un recorrido sistemático que permita una toma de muestras representativa de la parcela y excluyendo las orillas. El Estado miembro podrá autorizar la toma de la muestra durante el período comprendido entre el comienzo de la floración y los veinte días siguientes a ésta, siempre que procure que, por cada variedad cultivada, se efectúen otras tomas de muestras representativas según las normas anteriormente descritas, durante el período comprendido entre los veinte días siguientes al comienzo de la floración y los diez días siguientes al final de la misma.
  • — Procedimiento B: en una población de una variedad de cáñamo dada, se tomará el tercio superior de cada planta seleccionada. Las muestras se tomarán durante los diez días siguientes al final de la floración, durante el día, según un recorrido sistemático que permita una toma de muestras representativa de la parcela y excluyendo las orillas. En las variedades dioicas, sólo se tomarán muestras de plantas femeninas.

Tamaño de la muestra

  • — Procedimiento A: la muestra de cada parcela estará compuesta por las muestras de 50 plantas.
  • — Procedimiento B: la muestra de cada parcela estará compuesta por las muestras de 200 plantas.

Cada muestra se colocará en un saco de tela o papel, sin comprimirla, y se enviará al laboratorio de análisis.

El Estado miembro puede determinar que se recoja una segunda muestra, para un posible contranálisis, y que la conserve el productor o el organismo encargado del análisis.

Secado y almacenamiento de la muestra

Las muestras deberán comenzar a secarse lo antes posible y, en cualquier caso, en un plazo máximo de 48 horas, mediante un método en el que la temperatura sea inferior a 70 °C. Se secarán hasta alcanzar un peso constante y una humedad situada entre el 8 y el 13%.

Las muestras secas se conservarán, sin comprimir, en un lugar oscuro y a una temperatura inferior a 25 °C.

Análisis del contenido de THC

Preparación de la muestra de laboratorio

Los tallos y las semillas de más de 2 mm se eliminarán de las muestras secas.

Las muestras secas se triturarán hasta obtener un polvo semifino (tamiz de 1 mm de malla).

Conservación máxima del polvo durante diez semanas, en un lugar seco, oscuro y a una temperatura inferior a 25 °C

Reactivos, solución de extracción

Reactivos:

  • — Δ 9 -tetrahidrocanabinol cromatográficamente puro
  • — Escualano cromatográficamente puro como patrón interno

Solución de extracción

  • — 35 mg. de escualano por 100 ml. de hexano.

Extracción del Δ 9 -THC

Pesar 100 mg. de muestra de laboratorio en polvo y colocarlos en un tubo de centrifugadora; añadir 5 ml. de solución de extracción que contenga el testigo interno.

Sumergir todo ello durante veinte minutos en un baño de ultrasonidos. Centrifugar durante cinco minutos a 3 000 revoluciones/minuto y extraer la solución de THC que flota. Inyectar este último en el aparato de cromatografía y efectuar el análisis cuantitativo.

Cromatografía en fase gaseosa

a) Equipo

  • — Cromatógrafo en fase gaseosa provisto de un detector de ionización por llama e inyector con y sin fraccionamiento (split/splitless).
  • — Columna que permita una buena separación de los canabinoides, por ejemplo una columna capilar de cristal de 25 m de largo y 0,22 mm de diámetro impregnada de una fase apolar de tipo 5 % fenil-metil-siloxano.

b) Escalas de contraste

Como mínimo 3 puntos en el caso del procedimiento A y 5 en el del procedimiento B, con los puntos 0,04 y 0,50 mg. de Δ 9 -THC por ml. de solución de extracción.

c) Condiciones del equipo

Las condiciones siguientes son sólo un ejemplo y corresponden a la columna citada en la letra a):

  • — Temperatura del horno: 260 °C
  • — Temperatura del inyector; 300 °C
  • — Temperatura del detector: 300 °C

d) Volumen de inyección: 1 μl

Resultados.

El resultado se expresará con dos decimales, en gramos de Δ 9 -THC por 100 gramos de muestra de laboratorio, secada hasta un peso constante. Se aplicará al resultado una tolerancia de 0,03 % en valor absoluto.

— Procedimiento A: el resultado corresponderá a una determinación por muestra de laboratorio.

No obstante, en caso de que el resultado obtenido sea superior al límite previsto en el párrafo segundo del apartado 1 del artículo 5 bis del Reglamento (CE) no 1251/1999, se efectuará una segunda determinación por muestra de laboratorio y el resultado corresponderá a la media de ambas determinaciones.

— Procedimiento B: el resultado corresponderá a la media de dos determinaciones por muestra de laboratorio.»

Estas se han adaptado para tener en cuenta los aspectos prácticos y la variedad de productos de Cannabis sativa en el mercado ilícito. La importancia de la cantidad y composición en los delitos relativos a drogas tóxicas, estupefacientes y sustancias psicotrópica

Dentro de los delitos contra la seguridad colectiva del Titulo XVIII del Código Penal (LO 10/1995 de 23 de noviembre) se regulan en el Capitulo III los delitos contra la salud pública. Estas figuras delictivas tiene en común el objetivo de proteger la salud pública de los efectos nocivos de ciertas sustancias dañinas englobadas bajo los conceptos de drogas tóxicas, estupefacientes y sustancias psicotrópicas. Todas estas sustancias pueden producir graves alteraciones en el organismo que pueden ir desde una simple adicción hasta provocar la muerte o enfermedades graves que comprometan la salud de los consumidores. A pesar de su potencialidad es evidente que no todas las cantidades producen los mismos efectos, sino que una cantidad menor será menos perjudicial que una dosis mayor, y es por ello que la jurisprudencia tiene en cuenta la cantidad objeto de delito para imponer una mayor o menor pena, a pesar de que estén encuadradas dentro de las mismas conductas.

VN:F [1.9.22_1171]
Califica la calidad del articulo 1-5 GRACIAS
Rating: 5.0/5 (1 vote cast)
VN:F [1.9.22_1171]
Rating: 0 (from 0 votes)

Calculo del grado de humedad de Cannabis sativa

Calculo del grado de humedad de Cannabis sativa

Un modo de hacer el calculo de humedad en Calculo del grado de humedad de Cannabis sativa es con un detector de humedad para biomasa BM1 / BM2, este aparato sirve para determinar la humedad absoluta de biomasa con memoria de valores interna, modelo BM2 incluye interfaz RS-232 y software

El detector de humedad BM1/BM2 determina la humedad en la biomasa de manera rápida y precisa. El detector de humedad para biomasa no requiere preparación para las pruebas y proporciona valores de medición de humedad de la biomasa correspondiente en cuestión de segundos. Una característica importante del aparato es su memoria de valores interna (10.000 valores). Presionando una tecla se guarda en la memoria el valor de medición actual (con núm. de carga, fecha y hora). Esto posibilita su uso en el control de entrada y salida, la documentación de los envíos y un control sencillo en caso de reclamaciones o el cálculo por peso de la biomasa entregada. El modelo BM2 incluye un software y un cable de datos RS-232 que le permitirá realizar la transmisión y la valoración de los datos en el PC. Es necesaria una balanza para el funcionamiento del detector de humedad (rango de medición de 0 … 10 kg) que no se incluye en el aparato.

Por medio de las siguiente formulas podremos sacar el % de materia seca o de humedad

W – %

H – %

Materia seca

Humedad

( Ww/Ws )*100

((Ww-Ws)/Ws)x100

VN:F [1.9.22_1171]
Califica la calidad del articulo 1-5 GRACIAS
Rating: 0.0/5 (0 votes cast)
VN:F [1.9.22_1171]
Rating: 0 (from 0 votes)

Muestreo de la hierba de Cannabis Sativa

Muestreo de la hierba de Cannabis Sativa

En el mercado ilegal, se encuentran una gran variedad de productos de Cannabis sativa distintos, desde material vegetal suelto, hasta “flores secas”, “sobres de marihuana”, o “te de marihuana”.

Como se describe en la sección anterior, treinta piezas que se consideren pertenecientes al mismo fenotipo se toman como una muestra.

Si hay menos material, se coge todo. Las partes leñosas se desechan. Las semillas de las flores se guardarán.

Las muestras húmedas tienen que ser empaquetadas en bolsas de papel. Las muestras secas se pueden guardar en bolsas de plástico

VN:F [1.9.22_1171]
Califica la calidad del articulo 1-5 GRACIAS
Rating: 0.0/5 (0 votes cast)
VN:F [1.9.22_1171]
Rating: 0 (from 0 votes)

El muestreo en las incautaciones de productos de Cannabis sativa

Para los aspectos generales de muestreo cualitativo de muestras de unidades múltiples, consultar:

 [Drugs Working Group of the European Network of Forensic Science Institutes (ENFSI) and UNODC (2009), Guidelines for representative drug sampling:
(www.unodc.org/unodc/en/scientists/guidelines-on-representative-drug-sampling.html.).]

Para material con características externas evidentes, es decir, material reconocible como Cannabis sativa, un método de muestreo basado en el modelo de Bayes puede ser preferible al enfoque hipergeométrico.

 

VN:F [1.9.22_1171]
Califica la calidad del articulo 1-5 GRACIAS
Rating: 0.0/5 (0 votes cast)
VN:F [1.9.22_1171]
Rating: 0 (from 0 votes)

Tecnicas de muestreo en plantas de Cannabis sativa

Tecnicas de muestreo en plantas de Cannabis sativa

Para un campo de Cannabis sativa “visualmente se debe ver que todo el Cannabis sativa es de la misma especie o fenotipo”, recoger al menos 30 inflorescencias o frutos, cada uno de una planta distinta, cogidos al azar, nunca de los bordes del campo, cortar un trozo de unos 20 cm. y guardarlos en una bolsa de papel.

Para propósitos identificativos (análisis cualitativo), el muestreo de una planta representativa se considera suficiente.

[Drugs Working Group of the European Network of Forensic Science Institutes
(ENFSI) and UNODC (2009), Guidelines for representative drug sampling .]
http://www.unodc.org/documents/scientific/Drug_Sampling.pdf

Siempre que sea posible, la muestra debe ser secada antes de enviarla al laboratorio, si tiene que ser almacenada por cualquier razón antes de ser analizadas, debe ser en un lugar oscuro y fresco.

Una vez seca, la degradación de los cannabinoides principal se detiene. Sin embargo, en esta etapa de THC es todavía sensible al aire (oxígeno) y a la luz UV, la cual oxida el THC a CBN. Por lo tanto, las condiciones de almacenamiento idóneas son en algún lugar oscuro y fresco.

VN:F [1.9.22_1171]
Califica la calidad del articulo 1-5 GRACIAS
Rating: 0.0/5 (0 votes cast)
VN:F [1.9.22_1171]
Rating: 0 (from 0 votes)

Analisis de productos de Cannabis sativa

Analisis de productos de Cannabis sativa.

La razón principal de un procedimiento de muestreo es permitir un análisis químico adecuado y significativo. Debido a que la mayoría de los métodos cualitativos y cuantitativos, utilizados en los laboratorios de ciencia forense para el análisis de drogas requieren cantidades alícuotas muy pequeñas de material, es de vital importancia que estas pequeñas muestras alícuotas sean totalmente representativas de la muestra total. El muestreo deberá ajustarse a los principios de análisis químico, tal como se establece, por ejemplo, en las farmacopeas nacionales o las organizaciones internacionales.

[Drugs Working Group of the European Network of Forensic Science Institutes (ENFSI) and UNODC (2009), Guidelines for representative drug sampling (www.unodc.org/unodc/en/scientists/guidelines-on-representative-drug-sampling.html)].

Puede haber situaciones en las que, por razones legales, las reglas normales de toma de muestras y homogeneización no se puedan seguir. Esto sucede si, por ejemplo, el analista desea conservar una parte intacta como evidencia visual ante un tribunal. En el caso de tabletas de Cannabis sativa, es importante también asegurarse de que todo el bloque está compuesto homogéneamente de Cannabis sativa. Esto se logra partiendo el bloque haciendo palanca y examinando el material de cerca.

Los laboratorios forenses deben buscar, en todas las ocasiones que sea posible, utilizar un sistema de muestreo aprobado, que reduzca al mínimo el número de determinaciones cuantitativas necesarias.

Para facilitar este enfoque, se usa el método de muestreo recomendado por la Unión Europea para plantaciones de Cannabis sativa al aire libre para el cáñamo industrial.

[Official Journal of the European Communities of 28 December 2000 (L 332/63), Commission Regulation (EC) No 2860/2000 of 27 December 2000 .
(http://eur-lex.europa.eu/LexUriServ/LexUriServ.do?uri=OJ:L:2000:332:0063:0075:ES:PDF; retrieved January 2009)]
VN:F [1.9.22_1171]
Califica la calidad del articulo 1-5 GRACIAS
Rating: 0.0/5 (0 votes cast)
VN:F [1.9.22_1171]
Rating: 0 (from 0 votes)

Componentes quimicos de Cannabis sativa

Componentes quimicos de Cannabis sativa

Cannabis sativa. Componentes químicos de importancia forense
Cannabis sativa. Componentes químicos de importancia forense
VN:F [1.9.22_1171]
Califica la calidad del articulo 1-5 GRACIAS
Rating: 4.2/5 (5 votes cast)
VN:F [1.9.22_1171]
Rating: +1 (from 3 votes)

Receptores de cannabinoides

Receptores de cannabinoides

Antes de 1980, hubo mucha especulación sobre los efectos producidos sobre el físico y la psique a través de vía inespecífica en las membranas celulares por parte de los cannabinoides. El descubrimiento del primer receptor de cannabinoides en los años ochenta ayudó a resolver este debate. Estos receptores eran comunes en animales y fueron encontrados en mamíferos, aves, peces y reptiles. Actualmente hay dos tipos conocidos de receptores: el CB1 y el CB2.

Receptores de cannabinoides tipo 1 (CB1)

Los receptores CB1 fueron encontrados por primera vez en el cerebro, específicamente en los ganglios basales y en el sistema límbico. También fueron encontrados en el cerebelo y en los sistemas de reproducción de machos y hembras. Los receptores de CB1 están ausentes en la parte del tallo cerebral responsable de las funciones cardiovasculares y respiratorias. En consecuencia no hay riesgo de fallo cardiorrespiratorio como sucede con otras drogas. Los CB1 aparecen como responsables de la euforia y de los efectos anticonvulsivos de Cannabis sativa.

Receptores de cannabinoides tipo 2 (CB2)

Los receptores de tipo 2(CB2) se encuentran casi exclusivamente en el sistema inmunitario, con una gran cantidad en el bazo. Los CB2 son los responsables de la acción antinflamatoria.

Raharjo, T.J., et al. (2004), Cloning and overexpression of a cDNA encoding a polyketide synthase (PKS) from Cannabis sativa L., Plant Physiol. Biochem., 42, 291-297.

Futoshi, T. et al. (1995), J. Am. Chem. Soc. 117, 9766-9767-(1996), J. Biol. Chem. 271, 17411-17416

Fellermeier M., et al. (2001), Biosynthesis of cannabinoids, Incorporation experiments with 13C-labeled glucoses, European Journal of Biochemistry, 268 (6), 1596-1604.

Enciclopedia de Isidoro Rodríguez

VN:F [1.9.22_1171]
Califica la calidad del articulo 1-5 GRACIAS
Rating: 0.0/5 (0 votes cast)
VN:F [1.9.22_1171]
Rating: 0 (from 0 votes)

Principales cannabinoides de Cannabis sativa

Principales cannabinoides de Cannabis sativa

THC (delta-9-tetrahidrocannabinol)

Es el componente activo principal de Cannabis sativa, y es el responsable de los efectos psicoactivos de la planta, a partir de la cual se obtiene la hierba y el hachís. Desde un punto de vista clínico, es útil para aliviar el dolor moderado pues posee un efecto analgésico además de ser neuroprotector.

Δ-9-tetrahidrocannabinol y Δ-8-tetrahidrocannabinol, imitan la acción de la anandamida, un neurotransmisor producido de forma natural en el organismo. El THC produce el efecto de “subidón” asociado al Cannabis sativa a causa del enlace con el receptor CB1 del cerebro.

CBD (cannabidiol).

Responsable de los efectos narcóticos de la planta.

El cannabidiol es un narcótico o estupefaciente, pero no se considera un psicoactivo y se cree que no afecta a la actividad llevada a cabo por el THC. Recientemente se han hallado evidencias que demuestran que los fumadores de Cannabis sativa con una alta proporción de CBD/THC poseen menos tendencia a sufrir los síntomas de la esquizofrenia. Este hecho está apoyado por tests psicológicos en los cuales los participantes experimentan una pérdida de intensidad de los efectos sicóticos cuando se les administra THC junto a CBD. Esto nos conduce a la hipótesis que el CBD actúa como antagonista alostérico del CB1 (ver al final del artículo) y en consecuencia altera los efectos psicoactivos del THC. Médicamente, el CBD parece responsable del alivio de las convulsiones, inflamaciones, ansiedad y náuseas. El cannabidiol tiene una gran afinidad por el receptor de CB2, por el contrario por el CB1 no tanta. El cannabidiol comparte precursor con el THC

Recientemente se ha descubierto que el CDB es un potente agente antioxidante y antiinflamatorio capaz de proporcionar neuro-protección contra la neuro-degeneración aguda y crónica.

Hampson, A.J., Grimaldi, M., Axelrod, J. and Wink, D. (1998) Cannabidiol and D9-tetrahydrocannabinol are neuroprotective antioxidants. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 95, 8268–8273. – Lastres-Becker, I., Molina-Holgado, F., Ramos, J.A., Mechoulam, R. and Fernandez-Ruiz, J. (2005) Cannabinoids provide neuroprotection against 6-hydroxydopamine toxicity in vivo and in vitro: relevance to Parkinson’s disease. Neurobiol. Dis. 19, 96–107.

CBN (cannabinol).

Inhibidor del efecto del THC.

El cannabinol (CBN) es el producto primario de la degradación del THC y no se suele encontrar demasiado en la planta. El contenido en CBN va aumentando según la cantidad de THC que se degrada y por la exposición a la luz y al aire. Es un psicoactivo leve cuya afinidad es superior en el caso del receptor CB2 y baja en el CB1.

VN:F [1.9.22_1171]
Califica la calidad del articulo 1-5 GRACIAS
Rating: 0.0/5 (0 votes cast)
VN:F [1.9.22_1171]
Rating: 0 (from 0 votes)

Biosintesis de los canabinoides de Cannabis sativa

Biosintesis de los canabinoides de Cannabis sativa

El Cannabis sativa ha sido utilizado como un cultivo agrícola para las fibras textiles durante siglos, hay productos legítimos de Cannabis sativa, como semillas de Cannabis sativa, aceite de semilla de Cannabis sativa y aceite esencial de Cannabis sativa.

Los productos ilícitos de Cannabis sativa se clasifican en tres categorías principales: la hierba de Cannabis sativa, resina de Cannabis sativa y aceite de Cannabis sativa. Hay que destacar que no hay dos productos ilícitos derivados de Cannabis sativa que tengan la misma apariencia física.

Se producen una gran cantidad de productos naturales variables mediante procesos susceptibles de amplias variaciones y posteriormente son sometidos a tratamientos de transformación con distintos fines y en multitud de formas.

Hasta el momento se han aislado un total de 66 cannabinoides procedentes de la planta de Cannabis sativa aunque tres de ellos son los más conocidos:

Los cannabinoides se clasifican en dos tipos, los cannabinoides neutros y los ácidos cannabinoides, sobre la base de si contienen un grupo carboxilo o no. Se sabe que, en las plantas verdes, las concentraciones de cannabinoides neutros son mucho menores que las de ácidos cannabinoides.

http://www.medicinalgenomics.com/wp-content/uploads/2011/12/Cannabidiolic-acid-synthase-the-chemotype-determining-enzyme-in-fiber-type.pdf
Biosintesis de cannabis sativa
Biosintesis de cannabis sativa
VN:F [1.9.22_1171]
Califica la calidad del articulo 1-5 GRACIAS
Rating: 0.0/5 (0 votes cast)
VN:F [1.9.22_1171]
Rating: 0 (from 0 votes)
Proudly using Dynamic Headers by Nicasio WordPress Design